Rossana Bertini ha studiato al Conservatorio Francesco Morlacchi di Perugia, dove si è diplomata in canto lirico.

Ha collaborato con alcuni fra i più accreditati maestri specialisti del repertorio barocco, quali Rinaldo Alessandrini, Fabio Biondi, Alan Curtis, Enrico Gatti, Roberto Gini, Gilbert Bezzina, Martin Gester, Gabriel Garrido,  Fabio Bonizzoni, Federico Maria Sardelli, Claudio Cavina e si è esibita negli Stati Uniti d’America, in Giappone, in Israele, in Sud America e dappertutto in Europa.

Ha realizzato numerose incisioni discografiche con musiche di Monteverdi, Luzzaschi, Gesualdo, Marenzio, Haendel, A.Scarlatti, Vivaldi, A.Steffani, per etichette prestigiose,   ottenendo il Prix Cecilia, Deutsche Schallplattenpreis, Gramophone Award, Premio Vivaldi della Fondazione Cini di Venezia, Diapason d’Or, Gran Prix du Disque, Cannes Classical Award. Ha inoltre partecipato a  emissioni radiofoniche per RAI, Radio France, WDR, ORF, BBC, RTSI.

Nel 2009, con i colleghi Giuseppe Maletto e Daniele Carnovich, ha dato vita a La Compagnia del Madrigale.

Rossana Bertini è docente di canto lirico presso l’Accademia Musicale Alta Valdera (Peccioli – Pisa) ed insegna canto rinascimentale e barocco ai corsi di Pistoia Musica Antica.